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12-HETE Elisa Kit 
12-HETE Elisa Kit
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英文名稱 : Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid, 12-HETE Elisa Kit
貨號 : EY-00H1327
規格 : 96T/48T
品牌 : 上海一(yi)研
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12-HETE Elisa Kit原理:

ELISA試劑盒是固相夾(jia)心法酶(mei)(mei)聯免疫吸附實驗(ELISA).已(yi)知待(dai)測物質濃(nong)度的(de)標(biao)準品、未(wei)知濃(nong)度的(de)樣(yang)品加入微孔酶(mei)(mei)標(biao)板(ban)內進行(xing)檢測。先將(jiang)待(dai)測物質和(he)生(sheng)(sheng)物素(su)(su)標(biao)記的(de)抗(kang)體同時(shi)溫育(yu)。洗滌后(hou),加入親和(he)素(su)(su)標(biao)記過的(de)HRP。再經過溫育(yu)和(he)洗滌,去除未(wei)結合的(de)酶(mei)(mei)結合物,然后(hou)加入底物A、B,和(he)酶(mei)(mei)結合物同時(shi)作用。產生(sheng)(sheng)顏(yan)(yan)色。顏(yan)(yan)色的(de)深(shen)淺和(he)樣(yang)品中待(dai)測物質的(de)濃(nong)度呈比例(li)關系(xi)。

12-HETE Elisa Kit 組(zu)成:

序號(hao)

名稱

規格

1

酶標包被板

96 孔*1 可拆卸(xie)板

2

酶結合物

10ml*1

3

標準(zhun)品

1ml*6 瓶(ping)

4

緩沖(chong)液(ye)

6ml*1

5

顯色劑 A 液

6ml*1

6

顯色(se)劑 B 液

6ml*1

7

終(zhong)止液

6ml*1

8

濃縮洗(xi)滌液(*100)

50ml*1

9

封板膜(mo)

1

10

使用說明書

1

自備材料

1)蒸餾(liu)水。

2)加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3)振蕩器及(ji)磁力攪拌器等。

12-HETE Elisa Kit 標本要求

1.標本采(cai)集后盡早進(jin)行提取,提取按相關文獻進(jin)行,提取后應(ying)盡快(kuai)進(jin)行實驗。若不能馬上進(jin)行試驗,可將(jiang)標本放于-20℃保存,但應(ying)避免反復凍(dong)融

2.不(bu)能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制(zhi)辣根過氧化(hua)物酶的(HRP)活性。

2.操作步驟

1.編號(hao)(hao):將樣品(pin)對(dui)(dui)應微孔(kong)按序編號(hao)(hao),每板(ban)應設陰(yin)性對(dui)(dui)照 2 孔(kong)、陽(yang)性對(dui)(dui)照2 孔(kong)、空白對(dui)(dui)照 1

孔(kong)(空(kong)白(bai)對照孔(kong)不加樣品及酶標(biao)試劑,其(qi)余各(ge)步操作相同)

2.加(jia)(jia)樣(yang)(yang):分(fen)別在陰、陽(yang)性(xing)對照孔(kong)中加(jia)(jia)入陰性(xing)對照、陽(yang)性(xing)對照 50μl。然(ran)后在待測(ce)樣(yang)(yang)品(pin)孔(kong)先加(jia)(jia)樣(yang)(yang)品(pin)稀釋液 40μl,然(ran)后再加(jia)(jia)待測(ce)樣(yang)(yang)品(pin) 10μl。加(jia)(jia)樣(yang)(yang)將樣(yang)(yang)品(pin)加(jia)(jia)于酶(mei)標(biao)板孔(kong)底部,盡量不觸及孔(kong)壁(bi),輕輕晃動混勻,

3.溫育:用封(feng)板膜封(feng)板后(hou)置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮(suo)洗滌液用蒸餾(liu)水 30 倍稀釋(shi)后備用

5.洗滌(di):小心(xin)揭掉封板膜(mo),棄去(qu)液體,甩干(gan)(gan),每孔(kong)加滿洗滌(di)液,靜置 30 秒后(hou)棄去(qu),如此重復 5 次(ci),拍干(gan)(gan)。

6.加酶(mei):每孔加入(ru)酶(mei)標試劑 50μl,空白孔除(chu)外。

7.溫育(yu):操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯(xian)色(se)(se)(se):每孔先(xian)加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)(se)(se)劑 A50μl,再加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)(se)(se)劑 B50μl,輕輕震蕩混(hun)勻(yun),37℃避光顯(xian)色(se)(se)(se)10 分鐘.

10.終(zhong)止:每孔加終(zhong)止液(ye) 50μl,終(zhong)止反應(此時藍色(se)立(li)轉黃(huang)色(se))。

測定:以空白空調零,450nm 波長依序(xu)測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終(zhong)止液后 15 分(fen)鐘(zhong)以內進行。

12-HETE Elisa Kit 數據計算

1. 繪(hui)制標準曲線(xian):各標準品 OD 值減去底色即(ji)減去空白孔 OD 值,以 6 個(ge)標準

品的(de) OD 值(zhi)為縱坐標(biao) y,以(yi)標(biao)準品的(de)濃度為橫坐標(biao) x,繪制曲線(xian)圖,如圖示,

并計算(suan)出回(hui)歸方程 y=ax+b。

2. 將(jiang)待測樣品的(de) OD 值代入(ru)方程式(shi),計算各組樣品濃度(du),再乘以稀釋倍(bei)數(shu),即

為樣品的實際 ABP 濃(nong)度。

3. 敏感度(du):1.0 pg/ml

圖片1.png

注(zhu)意(yi)事項:

1. 實(shi)驗操作中必須使(shi)用一次性吸頭,避免交叉污(wu)染。

2. 加樣(yang):加樣(yang)時,要控制加樣(yang)速度,避免(mian)**孔(kong)(kong)與最后一孔(kong)(kong)間的時間間隔(ge)過大(da),否(fou)則將會導致(zhi)不同的預孵育(yu)時間,從而影響(xiang)

實驗的(de)準確性以及重復性。

3. 孵育:嚴格按照(zhao)說明書(shu)上規定的(de)孵育時間和溫度進行。

4. 反(fan)應時(shi)間的控制:加(jia)入(ru)底物后請定時(shi)觀察反(fan)應孔的顏(yan)色(se)變化,如果(guo)顏(yan)色(se)較深,請提前加(jia)入(ru)終止液終止反(fan)應。

5. 建議(yi)實驗前預測(ce)樣(yang)品含量,如(ru)樣(yang)品濃(nong)度過高,應(ying)對樣(yang)品進行稀(xi)釋,計算結(jie)果時(shi)乘以(yi)相應(ying)的稀(xi)釋倍數。

6. 建議使用(yong)(yong)本試(shi)劑(ji)盒時先做(zuo)(zuo)預實驗(即(ji)先做(zuo)(zuo)標準(zhun)曲(qu)線,試(shi)用(yong)(yong)幾個標本),如(ru)果對本試(shi)劑(ji)盒有任何疑(yi)問,可(ke)和所(suo)購(gou)經銷商聯系(xi),

如果因運輸過程導致試劑盒失效,可(ke)要求調換(huan),但概(gai)不承擔產(chan)品本身以(yi)外的任何損失。

12-HETE Elisa Kit安(an)全(quan)性

1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和(he)終止液。一旦接觸到這(zhe)些液體,請盡快用水沖(chong)洗(xi)。

2. 實(shi)驗中不(bu)要進食、抽煙(yan)或(huo)使用化妝品。

3. 不要(yao)用(yong)嘴吸取試劑(ji)盒里的任何成份。

保(bao)存條件及有效期:

1.試劑盒保存:2-8℃

2.有(you)效(xiao)期:6個月


買家數量成交時間
正品保障

確保所有產(chan)品(pin)都是原裝(zhuang)正(zheng)品(pin)

優質服務(wu)

優質服務,售后無憂

安(an)全包(bao)裝

統一包裝,保障產品安全運輸

正規發票(piao)

機打發票,附箱送達

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